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HEPENGBIO細(xì)胞總膽固醇酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
主要用途
HEPENGBIO細(xì)胞總膽固醇酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過膽固醇酯酶、膽固醇氧化酶和過氧化酶的酶連續(xù)反應(yīng)系統(tǒng)中產(chǎn)生的過氧化氫（H2O2），與氨基安替比林反應(yīng)，生成粉紅色的醌亞胺后吸光峰值的變化，即采用比色法來測(cè)定樣品中總膽固醇濃度的方法。其適用于各種細(xì)胞（動(dòng)物、人體等）裂解萃取樣品中總膽固醇、游離膽固醇、結(jié)合膽固醇的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，檢測(cè)敏感。
技術(shù)背景
膽固醇（cholesterol）是一類稱之為固醇類（sterols）或聚類異戊二烯（polyisoprenoid）或三萜皂甙元（triterpene）的多環(huán)化合物（polycyclic compound）。其分子式為cholest-5-en-3β-ol。膽固醇以游離（free form）和酯化結(jié)合（ester）兩種形式廣泛存在于所有動(dòng)物體內(nèi)，主要以游離形式循環(huán)于血液中，以脂化形式傳運(yùn)和貯存。膽固醇在膜功能和脂代謝以及激素合成中起著重要作用，與肝臟疾病、甲狀腺疾病、動(dòng)脈硬化和心臟疾病密切相關(guān)。酯化膽固醇（cholesterel ester）在膽固醇酯酶（cholesterol esterase）的水解下，轉(zhuǎn)化為游離膽固醇，進(jìn)一步由膽固醇氧化酶（cholesterol oxidase）氧化產(chǎn)生過氧化氫（H2O2）。在過氧化酶（peroxidase）的催化下，過氧化氫與氨基安替比林（4-amino-antipyrine；AAP）反應(yīng)，生成粉紅色的醌亞胺（quinoneimine）后吸光峰值的變化（波長500nm），來定量測(cè)定總膽固醇的濃度。其酶連續(xù)反應(yīng)系統(tǒng)為：
cholesterol esterase
cholesterol esters       →    cholesterol  +  free fatty acids
cholesterol oxidase
  cholesterol  +  O2   →    ketone  +  H2O2
peroxidase
AAP  +  phenol  +  2H2O2     →    quinoneimine   +  4H2O 
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO清理液（Reagent A）         120毫升
HEPENGBIO萃取液（Reagent B）     5毫升
HEPENGBIO緩沖液（Reagent C）     10毫升
HEPENGBIO反應(yīng)液A（Reagent D）     250微升
HEPENGBIO反應(yīng)液B（Reagent E）     250微升
HEPENGBIO底物液（Reagent F）     500微升
HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent G）     200微升
產(chǎn)品說明書      1份
保存方式
保存在－20℃冰箱里；HEPENGBIO底物液（Reagent F）和HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent G）避免光照；有效保證6月
用戶自備
1.5毫升離心管：用于標(biāo)準(zhǔn)樣品配制的容器
15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器
細(xì)胞刮脫棒：用于貼壁細(xì)胞脫離
微型臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品制備
烘箱：用于樣品萃取的孵育
恒溫水槽或培養(yǎng)箱：用于孵育反應(yīng)
平式搖蕩儀：用于反應(yīng)物混勻
比色皿或96孔板：用于反應(yīng)和比色分析的容器
分光光度儀或酶標(biāo)儀：用于比色分析