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植物查爾酮合成酶(chalcone synthase)活性比色法定量檢測試劑盒
產(chǎn)品編號 HPBIO-JM11277
中文名稱: 植物查爾酮合成酶(chalcone synthase)活性比色法定量檢測試劑盒
英文名稱:
本公司所有產(chǎn)品僅供實驗室科學(xué)研究使用,不得用于醫(yī)療診斷,食品,化妝品和其他用途。
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HEPENGBIO植物查爾酮合成酶(chalcone synthase)活性比色法定量檢測試劑盒
產(chǎn)品說明書
主要用途
HEPENGBIO植物查爾酮合成酶(chalcone synthase)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過香豆酰輔酶A和丙二酰輔酶A縮合反應(yīng)系統(tǒng)中釋放出巰基輔酶A,使用Ellman試劑后,產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化,即采用比色法來測定植物裂解樣品中酶活性的方法。其適合于各種植物組織,包括種子(seed)、葉片(leaf)、根(root)、胚胎葉(cotyledon)、上胚軸(epicotyl)等查爾酮合成酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
查爾酮合成酶(chalcone synthase;CHS;EC2.3.1.74)是聚酮體合成酶(polyketide synthase;PKS)大家屬中的一員,是啟動類黃酮(flavonoid)化合物合成通路中第一步關(guān)鍵酶,形成植物系統(tǒng)性獲得性抗性(systematic acquired resistance;SAR)的基礎(chǔ)。查爾酮合成酶存在于細菌、植物和真菌中。在所有裸子植物(gymnosperm)和被子植物(angiosperm)的各種不同發(fā)育階段中的不同組織中表達。查爾酮合成酶為同源二聚體,分子量為40至4000Kd,由環(huán)境壓力,包括UV照射、傷口、病原菌襲擊等誘導(dǎo),通過丙二酰輔酶A脫羧基反應(yīng)(decarboxylation)、與香豆酰輔酶縮合、聚酮體鏈延展(chain elongation)、中間產(chǎn)物環(huán)狀化(cyclization)和芳構(gòu)化(aromatization)產(chǎn)生查爾酮,一種類黃酮化合物前體,作為化學(xué)信使,由此生成各種后續(xù)繼發(fā)性代謝化合物,參與抗病原微生物例如異黃酮植物保護素(isoflavonoid phytoalexin)、花青素花色素化、抵御環(huán)境壓力(UV光保護)、花粉育性(pollen fertility)、抗氧化、共生根系結(jié)瘤(symbiotic root nodulation),以及作為抗生素、免疫抑制劑、抗腫瘤和抗真菌的藥物作用。還在細菌的囊腫形成和阿米巴細胞分化中產(chǎn)生作用?;谙愣辊]o酶A和丙二酰輔酶A,在敏感性抑制劑木犀草素(Luteolin)存在與否的情況下,受到查爾酮合成酶的作用,縮合產(chǎn)生查爾酮,并釋放出巰基輔酶A(CoA-SH),進而與Ellman試劑5,5-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)[5,5,-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid);DTNB]反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoic acid;TNB),通過其吸收峰值的變化(412nm波長),來定量分析查爾酮合成酶的活性。查爾酮合成酶反應(yīng)系統(tǒng)為:
chalcone synthase 
 4-Coumaroyl CoA  +  3 malonyl CoA       →      naringenin chalcone  +  4 CoA-SH  +  3CO2
                             
DTNB  +  CoA-SH  →   TNB  +  CoA-S-S-TNB
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO清理液(Reagent A)  60毫升
HEPENGBIO裂解液(Reagent B)  20毫升
HEPENGBIO緩沖液(Reagent C)  12毫升
HEPENGBIO反應(yīng)液(Reagent D)   1毫升
HEPENGBIO底物液(Reagent E)  1.5毫升
HEPENGBIO專性液(Reagent F)   400微升
產(chǎn)品說明書      1份
保存方式
保存HEPENGBIO緩沖液(Reagent C)、HEPENGBIO反應(yīng)液(Reagent D)和HEPENGBIO底物液(Reagent E)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;HEPENGBIO反應(yīng)液(Reagent D)和HEPENGBIO底物液(Reagent E)避免光照;有效保證6月
用戶自備
1.5毫升離心管:用于樣品操作的容器
15毫升錐形離心管:用于樣品制備的容器
DOUNCE勻漿器:用于裂解組織細胞
微型臺式離心機:用于樣品操作
200微升1厘米光徑比色皿或96孔板:用于比色的容器
分光光度儀或酶標(biāo)儀:用于比色分析
檢測報告(COA)
使用說明
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