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細胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1 （SIRT1）活性比色法定量檢測試劑盒說明書
主要用途
HEPENGBIO細胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1 （SIRT1）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過比色探針對硝基苯胺標(biāo)記人工合成的乙?；痯53多肽底物，經(jīng)過SIRT1脫乙?；?，被位點特異性氨基肽酶水解，釋放黃色對硝基苯胺，即采用比色法來測定細胞裂解萃取樣品中酶活性的方法。其適用于各種細胞裂解萃取液樣品（動物、人體）、核蛋白樣品、部分或完全純化酶樣品中SIRT1的活性定量檢測，以及抑制劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
人體組蛋白脫乙?；福╤istone deacetylase；HDAC）家屬分成三類共20多個蛋白：種類I（class I）與酵母Rpd3蛋白同源，包括HDAC1、2、3、8，存在于細胞核中；種類II（class II）與酵母Hda1蛋白同源，包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR，存在于細胞核和細胞漿里；上述兩大種類的蛋白分子催化結(jié)構(gòu)域含有鋅，且曲古菌素A（trichostatin A；TSA）敏感。種類III（class III）為NAD+輔助因子必需，又稱為sirtuins，與酵母Sir2（Silent Information Regulator 2）同源，包括SIRT1至7等，為曲古菌素A（trichostatin A；TSA）不敏感型賴氨酸脫乙?；福╨ysyl-deacetylase）。催化賴氨酸脫乙?；磻?yīng)，以及由NAD+和乙酰（acetyl）基團轉(zhuǎn)化產(chǎn)生的煙酰胺（nicotinamide）和O-乙酰ADP核糖（O-acetyl-ADP-ribose）。SIRT1位于細胞核內(nèi)，與酵母Sir2同源性最高。其功能在于調(diào)節(jié)p53活性和抑制細胞凋亡?；谌斯ず铣傻囊阴；痯53（379至382氨基酸位點）多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys（Ac）具有抗氨基肽酶切離的功能，首先使用比色染料對硝基苯胺（p-Nitroaniline；p-NA）來標(biāo)記乙?；痯53多肽底物，其次進行脫乙?；?，最后底物進一步在氨基肽酶的催化酶解，釋放出具有強烈吸光值的黃色對硝基苯胺（波長405nm），由此來定量測定沉默調(diào)節(jié)蛋白1的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：
Sirt1
Ac-Arg-His-Lys-Lys（Ac）-p-NA + NAD → Ac-Arg-His-Lys-Lys-p-NA + nicotinamide + O-acetyl-ADP-ribose
氨基肽酶
Ac-Arg-His-Lys-Lys-p-NA → Ac-Arg-His-Lys-Lys + p-NA
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO裂解液（Reagent A） 20毫升
HEPENGBIO分離液（Reagent B） 80毫升
HEPENGBIO清理液（Reagent C） 80毫升
HEPENGBIO萃取液（Reagent D） 5毫升
HEPENGBIO緩沖液（Reagent E） 3毫升
HEPENGBIO底物液（Reagent F） 100微升
HEPENGBIO終止液（Reagent G） 200微升
HEPENGBIO酶解液（Reagent H） 200微升
HEPENGBIO補充液（Reagent I） 500微升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存HEPENGBIO緩沖液（Reagent E）、HEPENGBIO底物液（Reagent F）、HEPENGBIO終止液（Reagent G）和HEPENGBIO酶解液（Reagent H）在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；其余的保存在4℃冰箱里；HEPENGBIO底物液（Reagent F）避免光照，有效保證6月
用戶自備
磷酸鹽緩沖溶液（PBS）：用于清洗細胞樣品
15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器
1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器
超聲儀：用于樣品操作
（微型）臺式離心機：用于細胞操作
培養(yǎng)箱：用于反應(yīng)物孵育
96孔板或100微升厘米光徑比色皿：用于反應(yīng)和比色的容器
酶標(biāo)儀或分光光度儀：用于比色分析
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細胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1 （SIRT1）活性比色法定量檢測試劑盒說明書
主要用途
HEPENGBIO細胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1 （SIRT1）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過比色探針對硝基苯胺標(biāo)記人工合成的乙?；痯53多肽底物，經(jīng)過SIRT1脫乙?；?，被位點特異性氨基肽酶水解，釋放黃色對硝基苯胺，即采用比色法來測定細胞裂解萃取樣品中酶活性的方法。其適用于各種細胞裂解萃取液樣品（動物、人體）、核蛋白樣品、部分或完全純化酶樣品中SIRT1的活性定量檢測，以及抑制劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
人體組蛋白脫乙?；福╤istone deacetylase；HDAC）家屬分成三類共20多個蛋白：種類I（class I）與酵母Rpd3蛋白同源，包括HDAC1、2、3、8，存在于細胞核中；種類II（class II）與酵母Hda1蛋白同源，包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR，存在于細胞核和細胞漿里；上述兩大種類的蛋白分子催化結(jié)構(gòu)域含有鋅，且曲古菌素A（trichostatin A；TSA）敏感。種類III（class III）為NAD+輔助因子必需，又稱為sirtuins，與酵母Sir2（Silent Information Regulator 2）同源，包括SIRT1至7等，為曲古菌素A（trichostatin A；TSA）不敏感型賴氨酸脫乙?；福╨ysyl-deacetylase）。催化賴氨酸脫乙?；磻?yīng)，以及由NAD+和乙酰（acetyl）基團轉(zhuǎn)化產(chǎn)生的煙酰胺（nicotinamide）和O-乙酰ADP核糖（O-acetyl-ADP-ribose）。SIRT1位于細胞核內(nèi)，與酵母Sir2同源性最高。其功能在于調(diào)節(jié)p53活性和抑制細胞凋亡?；谌斯ず铣傻囊阴；痯53（379至382氨基酸位點）多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys（Ac）具有抗氨基肽酶切離的功能，首先使用比色染料對硝基苯胺（p-Nitroaniline；p-NA）來標(biāo)記乙?；痯53多肽底物，其次進行脫乙?；?，最后底物進一步在氨基肽酶的催化酶解，釋放出具有強烈吸光值的黃色對硝基苯胺（波長405nm），由此來定量測定沉默調(diào)節(jié)蛋白1的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：
Sirt1
Ac-Arg-His-Lys-Lys（Ac）-p-NA + NAD → Ac-Arg-His-Lys-Lys-p-NA + nicotinamide + O-acetyl-ADP-ribose
氨基肽酶
Ac-Arg-His-Lys-Lys-p-NA → Ac-Arg-His-Lys-Lys + p-NA
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO裂解液（Reagent A） 20毫升
HEPENGBIO分離液（Reagent B） 80毫升
HEPENGBIO清理液（Reagent C） 80毫升
HEPENGBIO萃取液（Reagent D） 5毫升
HEPENGBIO緩沖液（Reagent E） 3毫升
HEPENGBIO底物液（Reagent F） 100微升
HEPENGBIO終止液（Reagent G） 200微升
HEPENGBIO酶解液（Reagent H） 200微升
HEPENGBIO補充液（Reagent I） 500微升
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保存方式
保存HEPENGBIO緩沖液（Reagent E）、HEPENGBIO底物液（Reagent F）、HEPENGBIO終止液（Reagent G）和HEPENGBIO酶解液（Reagent H）在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；其余的保存在4℃冰箱里；HEPENGBIO底物液（Reagent F）避免光照，有效保證6月
用戶自備
磷酸鹽緩沖溶液（PBS）：用于清洗細胞樣品
15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器
1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器
超聲儀：用于樣品操作
（微型）臺式離心機：用于細胞操作
培養(yǎng)箱：用于反應(yīng)物孵育
96孔板或100微升厘米光徑比色皿：用于反應(yīng)和比色的容器
酶標(biāo)儀或分光光度儀：用于比色分析
